Qual a carga do DNA por quê?
O DNA é molécula de carga negativa, compos- ta por nucleotídeos. Cada nucleotídeo é formado por um grupo fosfato, um açúcar (desoxirribose) e uma base nitrogenada. O grupo fosfato, de carga negativa, liga-se ao átomo carbono de número 5′ do açúcar.
Qual a função do brometo de Etídio e como ele funciona?
O brometo de etídio (EtBr) é um corante que está presente em quase todos os laboratórios de Biologia Molecular. Isso porque como característica principal ele consegue se intercalar entre os pares de base do DNA , tornando possível a sua visualização através da emissão de fluorescência sob a luz ultravioleta.
Qual a técnica de separação de fragmentos de DNA mais utilizada?
A técnica de separação dos fragmentos de DNA mais utilizada é a eletroforese através de géis de agarose. A agarose é um polissacarídeo (como ágar e pectina) que dissolve em água fervente e então gelifica quando esfria como a gelatina.
Como separar os fragmentos de DNA e RNA?
As moléculas de DNA e RNA são separadas com base em seu tamanho, enquanto as proteínas são separadas com base em tamanho e carga. A eletroforese em gel de agarose é a técnica usada para separar o DNA e o RNA. De 100 pb a 25 kb, os fragmentos de DNA podem ser separados por eletroforese em gel de agarose.
Como calcular o tamanho de um dado fragmento de DNA?
É possível calcular o tamanho exato de um dado fragmento com base na sua razão de migração. Após a eletroforese em gel, os fragmentos de DNA normalmente são corados com brometo de etídeo, que possui afinidade pelo DNA e fluorece (torna-se visível) vivamente em contato com a luz ultravioleta.
Por que os fragmentos de DNA estão carregados negativamente?
Os fragmentos DNA estão carregados negativamente, então movem-se na direção do eletrodo positivo. Já que todos os fragmentos de DNA têm a mesma quantidade de carga por massa, os fragmentos menores atravessam o gel mais rapidamente do que os maiores.